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dc.contributor.advisor1Otuki, Michel Fleith
dc.contributor.advisor1Latteshttp://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4765550U6por
dc.contributor.referee1Lima, Adilson Antonio Soares de
dc.contributor.referee1Latteshttp://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4784722H2por
dc.contributor.referee2Faveró, Giovani Marino
dc.contributor.referee2Latteshttp://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4770965A4por
dc.creatorBenso, Bruna
dc.creator.Latteshttp://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4426013E5por
dc.date.accessioned2017-07-24T19:22:17Z-
dc.date.available2012-05-02
dc.date.available2017-07-24T19:22:17Z-
dc.date.issued2012-02-28
dc.identifier.citationBENSO, Bruna. Study of the effect of Malva sylvestris in fibroblasts stimulated with LPS.. 2012. 70 f. Dissertação (Mestrado em Clinica Integrada, Dentística Restauradora e Periodontia) - UNIVERSIDADE ESTADUAL DE PONTA GROSSA, Ponta Grossa, 2012.por
dc.identifier.urihttp://tede2.uepg.br/jspui/handle/prefix/1780-
dc.description.abstractThe objective of this study was to develop biomonitoring of the hydroalcoholic extract of Malva sylvestris to evaluate the phytochemical profile beyond the effect of the hydroalcoholic extract of the plant on the release of IL-1β, TNF-α, LPS-induced nitric oxide, and finally, to assess possible toxicological effects of the extract. The activity of the various forms of extraction (soxhlet, maceration, turbolise and infusion) were tested using the ear edema model in mice, induced by 2-Otetradecanoylphorbol 13-acetate (TPA) and subsequently evaluated to determine which ethanol concentration presented the most anti-edematous activity. ESI-MS and LC-ESI-MS analyses were performed to exploit the ions that were representative of patterns of malvidin 3-glucoside, quercetin and scopoletin. Using in vitro tests, fibroblasts from the stock cell line 3T3 were grown in Dulbecco’s modified eagle medium (DMEM). The cells were analyzed by experimental tests after four passages. Stimulation with LPS in 3T3 fibroblasts resulted in an increased production of nitric oxide released in the cell culture supernatant. A method based on the use of fluorogenic probe (DAF-FM DA) was used to quantify the amount of nitric oxide. After sensitization with LPS, the release of IL-1 and TNF-α were measured, and subsequently separately evaluated by ELISA. To identify substances with genotoxic activity the Comet test was employed, using the technique of electrophoresis on microgel. The results demonstrated that at the highest dose tested (3.0 g/ml), the three forms of extraction were able to reduce ear edema by 44-46% and that the extract of Malva sylvestris in 100% ethanol concentration reached a higher inhibition (50.69%). In the in vitro tests, the treatment with hydroalcoholic extract was able to prevent the formation of nitric oxide by 80 ± 14% at the highest concentration used, in comparison to the control group, and the concentration of 1.0 g/ml was able to inhibit 86 ± 2% levels of IL-1. The levels of TNF-α were reduced by 84 ± 4%. The hydroalcoholic extract obtained by maceration at 100% concentration suggests an anti-inflammatory potential when used topically in a skin inflammation model. In assessing cell culture it suggests the interference of the extract on the IL-1 and TNF-α cytokines. This creates the need for further methods to investigate the cellular and molecular mechanisms on which the plant has an anti-inflammatory effect.eng
dc.description.resumoO objetivo deste trabalho foi desenvolver um biomonitoramento do extrato hidroalcóolico da Malva sylvestris (EHM), avaliar o perfil fitoquímico além do efeito do extrato hidroalcóolico da planta sobre a liberação de IL-1β, TNF-α, NO induzido por LPS e por fim, verificar possíveis efeitos toxicológicos do extrato. A atividade das várias formas extratoras (Soxhlet, Maceração, Turbólise e Infusão) foram testadas através do modelo de edema de orelha em camundongos induzido por 12-Otetradecanoilforbol 13-acetato (TPA) e posteriormente avaliado qual concentração etanólica apresentou maior atividade anti-edematogênica. As análises de ESI-MS e LC-ESI-MS foram realizadas para explorar os íons representativos dos padrões de malvidin 3-glucosídeo, quercetina e escopoletina. Em ensaio in vitro fibroblastos provenientes do banco de células, linhagem 3T3, foram cultivados em meio de cultura completo Dulbecco Mem (DMEM). As células foram analisadas para testes experimentais após quatro passagens. A estimulação com LPS em fibroblastos 3T3 ocasionou um aumento na produção de Oxido Nítrico liberado no sobrenadante de cultura de células, para quantificação de óxido nítrico foi utilizado o método baseado no uso de sonda fluorogênica (DAF-FM DA). Após sensibilização com LPS, a liberação de, IL-1 e TNF- foram quantificadas, e posteriormente foram avaliadas separadamente através do método de ELISA. Para o ensaio de identificação de substâncias com atividade genotóxica foi utilizado o Ensaio do Cometa através da técnica de eletroforese em microgel.Os resultados demonstraram que as três formas extratoras na maior dose testada (3.0 g/ml) do (EHM) foram capazes de reduzir o edema de orelha em 44- 46% e que o extrato da malva na concentração etanólica de 100% alcançou maior inibição (50,69%).Nos ensaios in vitro, o tratamento com o extrato hidroalcóolico foi capaz de impedir a formação de Oxido Nítrico em 80 ± 14% na maior concentração utilizada em comparação ao grupo Controle, e a concentração de 1,0 g/ml foi capaz de inibir 86 ± 2% os níveis de IL-1β. Os níveis de TNF – α foram reduzidos em 84 ± 4%. O (EHM) obtido pelo método de maceração na concentração de 100% sugere o potencial anti-inflamatório por via tópica em modelo de inflamação de pele, em avaliação em cultura de células sugere a interferência do extrato nas citocinas IL-1β e TNF–α, o que gera necessidade de outras metodologias a fim de investigar o mecanismo celular e molecular sobre a qual a planta exerce o efeito anti-inflamatório.por
dc.description.provenanceMade available in DSpace on 2017-07-24T19:22:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Bruna Benso.pdf: 1456799 bytes, checksum: df2a517354e51e0567f4105cdc729566 (MD5) Previous issue date: 2012-02-28en
dc.description.sponsorshipCoordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior
dc.formatapplication/pdfpor
dc.languageporpor
dc.publisherUNIVERSIDADE ESTADUAL DE PONTA GROSSApor
dc.publisher.countryBRpor
dc.publisher.departmentClinica Integrada, Dentística Restauradora e Periodontiapor
dc.publisher.programPrograma de Pós-Graduação em Odontologiapor
dc.publisher.initialsUEPGpor
dc.rightsAcesso Abertopor
dc.subjectMalva sylvestrispor
dc.subjectdoença periodontalpor
dc.subjectinflamaçãopor
dc.subjectMalva sylvestriseng
dc.subjectperiodontal diseaseeng
dc.subjectinflammationeng
dc.subject.cnpqCNPQ::CIENCIAS DA SAUDE::ODONTOLOGIApor
dc.titleESTUDO DO EFEITO DA Malva sylvestris EM FIBROBLASTOS ESTIMULADOS POR LPSpor
dc.title.alternativeStudy of the effect of Malva sylvestris in fibroblasts stimulated with LPS.eng
dc.typeDissertaçãopor
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